uu.seUppsala University Publications
Change search
CiteExportLink to record
Permanent link

Direct link
Cite
Citation style
  • apa
  • ieee
  • modern-language-association
  • vancouver
  • Other style
More styles
Language
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Other locale
More languages
Output format
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf
Två viktiga aminosyror i manganlipoxygenas(MnLOX) från FusariumOxysporum
Uppsala University, Disciplinary Domain of Medicine and Pharmacy, Faculty of Pharmacy, Department of Pharmaceutical Biosciences.
2015 (Swedish)Independent thesis Advanced level (degree of Master (Two Years)), 20 credits / 30 HE creditsStudent thesis
Abstract [sv]

Fusarium oxysporum är en växtpatogen som har visat sig kunna syntetisera jasmonsyra. Den infekterar både växter och djur och förstör en stor andel av skörden av majs och andra grödor. Genomet kodar för bland annat två lipoxygenaser, Fo-MnLOX och Fox-LOX. Lipoxygenaser (LOX) katalyserar stereo- och regiospecifik oxygenering av fleromättade fettsyror och bildar hydroperoxider. De flesta kända LOX har järn som katalytisk metall men nyligen har manganinnehållande LOX-enzymer upptäckts hos svampar. Det har noterats att FeLOX och MnLOX katalytiska reaktionen skiljer sig åt. Fo-MnLOX har mangan som katalytisk metall och har en unik katalytisk reaktion jämfört med de andra Mn-LOX. Fo-MnLOX abstraherar 11R vätet istället för 11S vätet från linolsyra och bildar 11R-HPODE, racemisk9-HPODE och 13S-HPODE. Aminosyrasekvensen för Fo-MnLOX jämfördes med sekvenser för andra MnLOX enzymer. Två aminosyror Leu530och Ser348 har identifierats som troliga orsaker till skillnaden i aktiviteten, eftersom de andra MnLOX har Arg respektive Phe i dessa positioner. Aminosyrautbytena Ser348Phe och Leu530Arg gjordes med hjälp av site-directed mutagenes. Enzym med respektive mutation uttrycktes i Pichia pastoris. Fo-MnLOX•Ser348Phe och Fo-MnLOX•Leu530Arg renades upp med hjälp av hydrofobisk interaktion kromatografi. Enzymaktivitet testades med hjälp av analytiska metoder såsom UV-spektrometri och HPLC-MS. Vi fann att Fo-MnLOX•Ser348Phe mutanten har förändrad stereoselektivitet jämfört med vildtypen genom att den abstraherar 11S vätet och bildar 11S-HPODE men den bibehåller den suprafaciala mekanismen för Mn-LOX. Däremot ger FoMnLOX•Leu530Arg mutanten samma produkter som vildtypen men med kraftigt minskad aktivitet.

Place, publisher, year, edition, pages
2015. , 20 p.
Keyword [sv]
Fusarium Oxysporum, Lipoxygenas
National Category
Pharmacology and Toxicology
Identifiers
URN: urn:nbn:se:uu:diva-262039OAI: oai:DiVA.org:uu-262039DiVA: diva2:854501
Subject / course
Pharmaceutical Pharmacology
Educational program
Master of Science Programme in Pharmacy
Supervisors
Examiners
Available from: 2016-10-07 Created: 2015-09-07 Last updated: 2018-01-11Bibliographically approved

Open Access in DiVA

No full text

By organisation
Department of Pharmaceutical Biosciences
Pharmacology and Toxicology

Search outside of DiVA

GoogleGoogle Scholar

urn-nbn

Altmetric score

urn-nbn
Total: 223 hits
CiteExportLink to record
Permanent link

Direct link
Cite
Citation style
  • apa
  • ieee
  • modern-language-association
  • vancouver
  • Other style
More styles
Language
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Other locale
More languages
Output format
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf